spl_autoloade_unregister خلاف spl_autoloade_register عمل میکنه یعنی با register یک فعال میکنید و با unregister اون فانکشنو غیر فعال میکنید تا براساس اون autoload ای صورت نگیره.

function my_autoloader($class) {
    include 'classes/' . $class . '.class.php';
}
spl_autoload_register('my_autoloader');
var_dump(spl_autoload_functions());
spl_autoload_unregister('my_autoloader');
var_dump(spl_autoload_functions());